بررسی ملکولی تنظیم بیان ژن باکتریوفریتین (bfr ) در اشرشیاکولی با استفاده از ژن گزارشگر lac z

آهن یک ریز مغزی ضروری است اما علیرغم این ویژگی دارای مشکلاتی همچون ایجاد سمیت در غلظت های بالا و عدم در دسترس بودن برای میکروارگانیسم ها ی هوازی می باشد . باکتری اشرشیاکولی با بکارگیری حداقل دو نوع پروتئین ذخیره کننده آهن با این مشکلات مقابله می کند که این پروتئین ها عبارتند از : ftna ( فریتین ) که پروتئین اصلی ذخیره آهن است و باکتریوفریتین حاوی هم ( bfr ) که نقش آن بطور کامل مشخص نشده است . یک پروتئین global regulator وابسته به آهن ، تحت عنوان fur (ferric uptake regulator ) بیان بسیاری از ژن های پاسخگو به آهن مثل ژن های ftna , bfr که بیان کننده ftna و bfr هستند را تنظیم می نماید . کمپلکس fe 2+- fur از طریق اتصال به توالی 19 جفت بازی (جعبه آهن ) که معمولا نزدیک جعبه پریبنو پروموتور های مربوطه قرار دارد ، رونویسی را متوقف می کند . هم چنین fur می تواند به عنوان یک فعال کننده رونویسی ، ژن های بسیاری را مثل ftna , bfr روشن کند . مکانیسم این فعال سازی معلوم نیست اما به نظر می رسد که مکانیسم آن غیر مستقیم باشد زیرا هیچ جعبه آهنی برای آن در نواحی فوق وجود ندارد . یک ناحیه بین ژنی 71 جفت بازی بین bfr و ژن بالادست آن یعنی bfd قرار دارد . در این تحقیق ما ناحیه بین ژنی را برای یافتن توالی تنظیمی که بیا ن bfr را تحت تاثیر قرار می دهد ، مطالعه کردیم .برای این بررسی ، قطعات مختلفی از dna از ژن bfr ساخته شد این قطعات هر بار از طریق حذف کردن تعدادی از نوکلئوتید ها از ناحیه بین بین ژنی bfd-bfr به همراه برخی تغییرات در این ناحیه بدست آمدند .قطعات ساخته شده در ناحیه کد کننده یک وکتور حاوی ژن lac z به عنوان ژن گزارشگر کلون گردیدند. بعد از تکتیر قطعات در سویه dh5? ، فعالیت بتا گالاکتوزیداز را اندازه گیری کردیم .نتایج حضور یک توالی موثر در بیان باکتریوفریتین را اثبات کرد .